傳統(tǒng)生產(chǎn) GlcN 的方法是以海洋蝦 蟹殼為原料, 采用強酸逐步水解制備得到, 其過程耗費時 間長且需要消耗大量酸和能量, 在工業(yè)制備 GlcN 中會對 環(huán)境造成不利影響。因此, 直接以 N-乙酰氨基葡萄糖 (N-acetylglucosamine, GlcNAc)作為原料, 避免了由蝦蟹原 材料帶來的季節(jié)性和過敏性的問題。恒溫培養(yǎng)箱(上海新苗醫(yī)療器械制造有 限公司); FA 20048 分析天平(精度 0.0001 g, 上海佑科儀 器儀表有限公司); SW-CJ-1FD 超凈工作臺(蘇州蘇潔凈 化設備有限公司); HR-T16M 臺式高速冷凍離心機(湖南 赫西儀器裝備有限公司); JY96-IIN 超聲破碎儀(寧波新 芝生物科技股份有。

    將 PBS 用超純水稀釋至 0.005、0.010、0.050、0.100、 0.200 mol/L 濃度, 分別加入 GlcNAc 至底物終質(zhì)量濃度為 5 g/L。取 100 μL Pd-nagA 純酶與含有 5 g/L GlcNAc 上述 不同濃度緩沖液混合后置于水浴鍋 45℃下反應 7 h, 采 用 OPA 法檢測產(chǎn)物 GlcN 的生成量。相對酶活力的計 算是以純水作為反應緩沖液時, 測得的酶活力定義為 100%。